考馬斯藍(lán)染色
coomassie blue staining
又稱(chēng)Bradford法,由于其突出的優(yōu)點(diǎn),正得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。
考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。考馬斯亮藍(lán)G-250在游離狀態(tài)下呈紅色,zui大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有zui大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。
手上沾到了?
和皮膚中蛋白質(zhì)通過(guò)范德華力結(jié)合,反應(yīng)快速,并且穩(wěn)定,無(wú)法用普通試劑洗掉。待一兩周左右,皮屑細(xì)胞自然衰老脫落即可無(wú)礙。